儀器名稱:紫外/可見分光光度計系統(tǒng)
儀器型號:Lambda 25
生產(chǎn)廠家:perkinElmer
使用方法:開機步驟
1 開光譜儀電源
2 開計算機電源
3 在文件治理器中用鼠標指按UV WinLab圖標,分光光度計此時出現(xiàn)UV WinLab的應(yīng)用窗口,儀器已預(yù)備好,可選用適當方法進行分析操縱。
2 方法:在分析中必須對分光光度計設(shè)定一些必要的參數(shù),這些參數(shù)的組合就形成一個“方法”。Lambda系列UV WinLab軟件預(yù)設(shè)四類常用方法。
1)掃描(SCAN),用以進行光譜掃描。
2)時間驅(qū)動(TIME DRIVER),分光光度計用以觀察一定時間內(nèi)某種特定波優(yōu)點縱坐標值的變化,如酶動力學。
3)波長編程(WP)用以在多個波長下測定樣品在一定時間內(nèi)的縱坐標值變化,并可以計算這些縱坐標值的差或比值。
4)濃度(CONC)用以建立標準曲線并測定濃度。
2.1 進進所需方法,在方法窗口中選擇所需方法的文件名。
2.2 方法的設(shè)定
2.2.1 掃描、波長編程及時間驅(qū)動
各項方法可根據(jù)顯示的參數(shù)表,分光光度計逐項按需要選用或填進,并可參考提示。
2.2.2 濃度
濃度方法窗口下方標簽較多,說明做濃度測定時需要參數(shù)較多。用鼠標指按每一標簽,可翻出下頁,其上有一些需要測定的參數(shù)。必須逐頁設(shè)定。
3 工具條
3.1 SETUP
當所需的各項參數(shù)都已在參數(shù)中設(shè)好后,分光光度計必須用鼠標指按SETUP,才能將儀器調(diào)整到所設(shè)狀態(tài)。
3.2 AUTOZERO
用鼠標指按此鍵,分光光度計即進行調(diào)零(在光譜掃描中則進行基線校正)。
3.3 START
用鼠標指按此鍵,分光光度計光度計即開始運行所設(shè)定的方法。
4 方法運行
4.1 掃描,時間驅(qū)動,波長編程
方法選好后,先放進參比溶液,按AUTOZERO鍵,進行自自動校零或背景校正結(jié)束后再放進樣品,按START,分光光度計即開始進行,同時屏幕上出現(xiàn)圖形窗口,將結(jié)果顯示出來。
4.2 濃度
4.2.1制訂標準曲線
1 方法選好后,確認各項數(shù)據(jù)正確,特別是REFS頁中第一行要選中右上角的“edit mode”。再放進參比溶液,按AUTOZERO鍵自動校零或背景校正。
2 按setup,待該圖標消失后,再按“start”,按提示依次放進標準色列的各管溶液,每次都按提示進行操縱。
3 分光光度計標準色列測定 完畢后,屏幕上出現(xiàn)calibgraphwindow,顯示擬合的標準線,并標出各項標準管的位置,屏幕下方還有一條Concentration mode的對話框,可以用來修改擬合的曲線類型(按 change calbration),或修改標準溶液的任何一管(replace),或取消某一管(delete),或增加標準溶液管數(shù)(add)。如過已經(jīng)滿足,則按analyse sample鍵,進進樣品測定窗口。